Tên đề tài: “Phân lập, biểu hiện gene mã hóa endo-β-1,4-glucanase từ Aspergillus niger và nghiên cứu tính chất của enzyme tái tổ hợp”.
Chuyên ngành: Di truyền học Mã số: 62 42 70 01
Họ và tên NCS: Phạm Thị Hòa
Cán bộ hướng dẫn: 1. PGS TS Quyền Đình Thi, Viện Công nghệ sinh học
2. PGS TS Nghiêm Ngọc Minh, Viện Công nghệ sinh học
Cơ sở đào tạo: Viện Công nghệ sinh học, Viện Khoa học & Công nghệ Việt Nam
TÓM TẮT NHỮNG KẾT LUẬN MỚI CỦA LUẬN ÁN
Trong số 63 chủng Aspergillus niger do Bảo tàng giống chuẩn Vi sinh vật (VTCC) cung cấp được khảo sát (kí hiệu VTCC-F001 đến VTCC-F714), chủng A. niger VTCC-F021 sinh tổng hợp EglA cao nhất. Trình tự gene 26S rRNA khẳng định thêm chủng này là A. niger và được đăng ký trong GenBank với mã số GQ382274.
Endo-b-1,4-glucanase từ A. niger VTCC-F021 tinh sạch có khối lượng phân tử 31 kDa, hoạt tính riêng 14 U/mg protein với hiệu suất thu hồi 18%, độ sạch 2,55 lần. Endo-b-1,4-glucanase hoạt động tốt nhất ở 55°C và pH 5, bền ở dưới 50°C và pH 5-6. EDTA và ion Cu2+, Fe2+ hoạt hóa b-glucanase, còn các ion kim loại khác đều ức chế b-glucanase. Endo-b-1,4-glucanase kháng cao với methanol, ethanol, Tween 20 và Tween 80, giữ được hơn 80% hoạt tính khi ủ với ethanol, methanol 10-20% (v/v) và Tween 20 và Tween 80 0,5-2% (v/v).
Nhân dòng và xác định được trình tự gene eglA (họ 12 glycosyl hydrolase) mã hóa b-glucanase A từ A. niger VTCC-F021, được đăng kí trong GenBank với mã số GU445334. Lần đầu tiên biểu hiện thành công gene eglA mã hóa endo-b-1,4-glucanase A thuộc họ 12 glycosyl hydrolase trong P. pastoris GS115 và trong A. niger DSM 1957.