Tên đề tài: “Phân lập, biểu hiện gene mã hóa endo-β-1,4-glucanase từ Aspergillus niger và nghiên cứu tính chất của enzyme tái tổ hợp”.
Chuyên ngành: Di truyền học Mã số: 62 42 70 01
Họ và tên NCS: Phạm Thị Hòa
Cán bộ hướng dẫn: 1. PGS TS Quyền Đình Thi, Viện Công nghệ sinh học
2. PGS TS Nghiêm Ngọc Minh, Viện Công nghệ sinh học
Cơ sở đào tạo: Viện Công nghệ sinh học, Viện Khoa học & Công nghệ Việt Nam
TÓM TẮT NHỮNG KẾT LUẬN MỚI CỦA LUẬN ÁN
-
Trong số 63 chủng Aspergillus niger do Bảo tàng giống chuẩn Vi sinh vật (VTCC) cung cấp được khảo sát (kí hiệu VTCC-F001 đến VTCC-F714), chủng A. niger VTCC-F021 sinh tổng hợp EglA cao nhất. Trình tự gene 26S rRNA khẳng định thêm chủng này là A. niger và được đăng ký trong GenBank với mã số GQ382274.
-
Endo-b-1,4-glucanase từ A. niger VTCC-F021 tinh sạch có khối lượng phân tử 31 kDa, hoạt tính riêng 14 U/mg protein với hiệu suất thu hồi 18%, độ sạch 2,55 lần. Endo-b-1,4-glucanase hoạt động tốt nhất ở 55°C và pH 5, bền ở dưới 50°C và pH 5-6. EDTA và ion Cu2+, Fe2+ hoạt hóa b-glucanase, còn các ion kim loại khác đều ức chế b-glucanase. Endo-b-1,4-glucanase kháng cao với methanol, ethanol, Tween 20 và Tween 80, giữ được hơn 80% hoạt tính khi ủ với ethanol, methanol 10-20% (v/v) và Tween 20 và Tween 80 0,5-2% (v/v).
-
Nhân dòng và xác định được trình tự gene eglA (họ 12 glycosyl hydrolase) mã hóa b-glucanase A từ A. niger VTCC-F021, được đăng kí trong GenBank với mã số GU445334. Lần đầu tiên biểu hiện thành công gene eglA mã hóa endo-b-1,4-glucanase A thuộc họ 12 glycosyl hydrolase trong P. pastoris GS115 và trong A. niger DSM 1957.
- rEglA tinh sạch có khối lượng phân tử khoảng 33 kDa, hoạt tính riêng 16,2 U/mg protein, hiệu suất thu hồi 50% và độ sạch đạt 2,7 lần. rEglA hoạt động cao nhất ở 55°C và pH 5, bền ở 30-37°C và pH 3,5-4,5. rEglA có ái lực cao với b-glucan (Kcat/Km với cơ chất b-glucan là 505,05 min-1). Cu2+ và EDTA hoạt hóa rEglA. Các ion kim loại khác đều làm giảm hoạt tính của rEglA. rEglA giữ được 70-98% khi ủ với ethanol, acetone 10-20% (v/v) và Tween 20, Tween 80 0,5-2% (v/v).
Tin mới hơn
Tin cũ hơn
- NCS. Huỳnh Thị Thu Huệ bảo vệ luận án Phiên chính thức - 05-07-2012
- Thông báo tuyển sinh Sau đại học (Bậc Tiến sĩ) đợt tháng 8/2012 - 07-06-2012
- NCS. Bạch Thị Như Quỳnh bảo vệ Luận án Phiên chính thức - 18-05-2012
- Danh sách trúng tuyển nghiên cứu sinh năm 2012 (Đợt 1) - 17-04-2012
- Công nhận học vị và cấp bằng tiến sĩ năm 2012 - 16-02-2012